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Type: TESE
Title: Supressão e recolonização da placa bacteriana in vitro por S. mutans e S. sobrinus e seu significado em relação a carie dentaria
Author: Pereira, Cassio Vicente
Advisor: Hofling, José Francisco, 1947-
Abstract: Resumo:O envolvimento de S. mutans e S. sobrinus nas relações de supressão e recolonização dentária, tem chamado a atenção dos pesquisadores no sentido de se entender melhor os mecanismos que determinam as interações entre esses microrganismos. A presente pesquisa teve como objetivo principal, contribuir para o entendimento do fenômeno in vitro entre esses microrganismos (amostras estreptomicina e rifampicina resistentes), da quantificação de placa in vitro e a produção de ácidos e polissacarídeos extracelulares frente a diferentes carboidratos. Para a quantificação da placa bacteriana in vitro, amostras de S. mutans e S. sobrinus, isoladas e em associação, foram inoculadas em tubos contendo meio BHI acrescido de diferentes carboidratos - sacarose, glicose, frutose, glicose + frutose adicionados de um bastão-capilar previamente pesado, possibilitando a quantificação de placa úmida formada. Para determinação da produção de ácidos, foram utilizadas medições contínuas, em intervalos de tempo regulares e crescentes, do pH dos meios de cultura acrescidos dos diferentes açúcares, onde as amostras de S. mutans e S. sobrinus foram cultivadas. Os experimentos para determinação de carboidratos totais solúveis em ácido e em álcali, foram realizados pelo método de dosagem destas substâncias, baseado na reação de um açúcar quando na presença de um ácido forte, formando compostos furfúricos. Para a determinação das relações de supressão bacteriana, amostras de S. mutans e S. sobrinus foram inoculadas em meios de cultura acrescidos dos diferentes carboidratos - sacarose, glicose, frutose e glicose + fruto se. A determinação da colonização e recolonização da placa bacteriana "in vitro" foi dividida em três experimentos distintos: inoculação simultânea de S. mutans e S. sobrinus, inoculação de S. mutans sobre a placa pre-formada por S. sobrinus e inoculação de S. sobrinus sobre placa pre-formada por S. mutans em tubos contendo meios de cultura acrescidos dos diferentes carboidratos. Em adição aos experimentos de supressão, colonização e recolonização da placa in vitro, determinou-se o número de UFC/rnL de cada espécie. De acordo com os resultados da quantificação da placa bacterianainvitro, a espécie S. mutans e a associação S. mutans / S. sobrinus apresentaram a maior produção de placa (14,50 mg e 7,92 mg /placa, respectivamente) quando cultivadas em meios de culturas acrescidos de 10% de sacarose. Os valores médios encontrados nas medições de pH dos meios de cultura acrescidos dos diferentes substratos - onde foram cultivadas as amostras de S. mutans e S. sobrinus - expressaram quedas significativas de pH nos intervalos de tempo estabelecidos. Os resultados obtidos na determinação de carboidratos totais solúveis em ácido, demonstraram que em meios de cultura acrescidos de sacarose e glicose + frutose, a espécie S. mutans, isoladamente, produziu concentrações mais elevadas destes carboidratos, com diferenças estatisticamente significantes em relação às espécies S. sobrinus e a associação S. mutans / S. sobrinus. As amostras de S. mutans e S. sobrinus, isoladamente e em associação, produziram elevadas concentrações de carboidratos totais solúveis em álcali quando cultivadas em meios de cultura acrescidos de fiutose e glicose + fiutose; Nos experimentos de supressão e recolonização da placa bacteriana in vitro, os resultados demonstraram que, em todas as culturas mistas de. S. mutans e S. sobrinus não houve detecção de células viáveis de S. sobrinus à partir do período de 12 horas de incubação e a espécie S. mutans inibiu o crescimento e recolonizou a placa pré - formada por S. sobrinus. Os resultados apresentados nesta pesquisa, sugerem que substâncias antibacterianas produzidas pelo S. mutans podem inibir o crescimento de outras espécies, corroborando com outros dados da literatura - nesta linha de investigação - os quais apontam para um melhor entendimento dos mecanismos de interação bacteriana que envolvem estes mI Crorgamsmos

Abstract: The involvement of the S. mutans and S. sobrinus in the dental colonization has directed the attention of the researchers in order to understand the mechanisms determining the interactions between these microrganisms. Thepresent research aimed to evaluate the mechanisms of supression and recolonization of the bacterial plaque "in vitro" between these microrganisms (streptomycin and rifampycin-resistent samples) and the plaque quantification "in vitro" beside acid and extracellular polysaccharide production by these species - isolated and in association - under different carbohydrates. For the quantification of the bacterial plaque "in vitro ", samples of S. mutans and S. sobrinus, isolated and in association, were inoculated in BHI media of different carbohydrates sucrose, glucose, ITuctose, glucose + ITuctose added of a capillary stick previously weighted making possible the quantification of humid plaque "in vitro". The determination of acids production, continous measurements of the pH was made (in regular and growing time intervals) using culture media under different substrates where the S. mutans and S. sobrinus samples were cultivated. The experiments for the total soluble carbohydrates determination . in . acid and in alkali. were accomplished by the metod of total carbohydrates dosage in reaction of a sugar in presence of a strong acid, forming sulfuric compounds. Samples of S. mutans and S. sobrinus were inoculated in culture media added of different carbohydrates- sucrose, glucose, ITuctose and glucose + ITuctose for the determination of bacterial suppression. For the colonization and recolonization process of bacterial plaque "in vitro", the tests was done as following: simultaneous inoculation of S. mutans and S. sobrinus, inoculation of S. mutans on the pre-fonned plaque by S. sobrinus and inoculation of S. sobrinus on the pre-formed plaque by S. mutans in culture media added of different carbohydrates. On the supression, colonization and bacterial recolonization, BHI ¿ agar mediaplus streptomycin or rifampycin. was used to detennine the CFU/rnL for each specie. The quantification of the bacterial plaque "in vitro", of the S. mutans specie and the association S. mutans IS. sobrinus showed the largest production of plaque (14,50 mg and 7,92 mg/plaque, respectivelIy) when cultivated in culture media added of 10% of sucrose. Measurements of the culture. media pH added of different substrates, of S. mutans and S. sobrinus species cultivation showed significant drops of the pH in alI the time intervals. The total soluble acid carbohydrates detennination using culture media added of sucrose and glucose + ITuctose, revealed that the S. mutans specie was responsable for the production of higher concentrations of these compounds in relation to S. sobrinus and the association of S. mutans / S. sobrinus. The S. mutans and S. sobrinus samples showed high concentration of total carbohydrates in alkali when cultivated in culture media added of ITuctose and glucose + ITuctose. The experiments involving suppression and recolonization of the bacterial plaque "invitro" inc1udingS. mutans and S. sobrinus mixedcultures of 12 hours incubation period does not showed any viable celIs left of S. sobrinus solely and the S. mutans specie was able to inhibite the growth and the recolonization of the bacterial plaque "in vitro" pre-fonned by S. sobrinus. The results described in this research suggest that antibacteriasubstances produced by S. mutans may inhibit the growing of other species in accordance to the literature data available showing its significance in the bacterial plaque formation
Subject: Cárie dentária
Boca - Microbiologia
Placas dentárias
Language: Português
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2001
Appears in Collections:FOP - Tese e Dissertação

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