Please use this identifier to cite or link to this item: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/288637
Type: TESE
Degree Level: Doutorado
Title: Analise da diversidade genetica de Prevotella intermedia em individuos com doença periodontal
Author: Alves, Ana Claudia Braga Amoras
Advisor: Gonçalves, Reginaldo Bruno, 1966-
Abstract: Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade genética da espécie Prevotella intermedia em indivíduos com doença periodontal, por meio de duas técnicas, a reação em cadeia da polimerase com primers arbitrários (AP-PCR) e análise heteroduplex de produtos amplificados pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Amostras subgengivais foram obtidas de sítios com e sem destruição periodontal de 36 voluntários. Após o cultivo e identificação bacteriana, os isolados de P. intermedia foram submetidos à técnica de genotipagem utilizando AP-PCR. Adicionalmente, as amostras clínicas subgengivais, com resultado positivo para o cultivo de P. intermedia, foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) com primer espécie específico e em seguida, os produtos amplificados foram submetidos à análise heteroduplex. Os resultados revelaram que os anaeróbios pigmentados negros foram mais freqüentes em sítios doentes, sendo a P. intermedia a mais prevalente dentre as espécies isoladas. A maioria dos indivíduos foi colonizada por um a dois tipos de genótipos, com relação positiva entre o número de clones e a profundidade de sondagem. Não houve detecção de genótipos idênticos entre os sítios de isolamento, em um mesmo ambiente bucal. Na análise interindivíduos, nenhum voluntário compartilhou o mesmo perfil eletroforético, indicando ampla heterogeneidade genética da espécie. Coincidindo com a técnica de AP -PCR, a análise heteroduplex detectou a presença de uma a dois clones distintos de P. intermedia nas amostras clínicas. Em conclusão, os indivíduos com doença periodontal abrigaram poucos tipos clonais e a coincidência de perfil genético entre sítios de um mesmo indivíduo e entre indivíduos não foi observada

Abstract: The aim of this study was to assess the genotypic diversity of P. intermedia on subjects with periodontal disease using two techniques, the arbitrarily primed polymerase chain reaction (AP-PCR) method and heteroduplex analysis from products amplified by polymerase chain reaction (PCR). Subgingival plaque samples were taken from the sites with and without periodontal destruction in 36 volunteers. After the culturing and identification procedures, the AP-PCR method was used for the genotypic characterization of P. intermedia strains. In addition, the clinical samples with a positive result for culture of the P. intermedia were amplified by polymerase chain reaction (PCR) method with a specie-specific primer and, after that, the PCR products were compared by the heteroduplex analysis. The results indicated that black-pigmented anaerobes were frequently cultured from periodontal diseased sites and P. intermedia were the most prevalent among the species recovered. Most of the subjects harbored between one to two distinct genotypes of P. intermedia, with a positive relation between numbers of genotypes and pocket probing depth. No matching of P. intermedia genotypes was observed between periodontal sites of the same individual. Interindividual genetic diversity has demonstrated absence of identical clones, indicating a high level of genetic diversity. The heteroduplex analyses of PCR products revealed that the majority of clinical samples harbored one to two clonal types, just like the AP-PCR technique. In conclusion, the subjects with periodontal disease harbored few clonal types and no identical genotypes between sites in the same individual and between individuals were found
Subject: Boca - Microbiologia
Genética
Diversidade
Language: Português
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2003
Appears in Collections:FOP - Tese e Dissertação

Files in This Item:
File SizeFormat 
Alves_AnaClaudiaBragaAmoras_D.pdf435.45 kBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.