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Type: TESE
Title: Separação enantiomérica do marcador molecular fmoc-poac em fase estacionária normal e reversa
Title Alternative: Enantiomeric separation of fmoc-poac spin label by HPLC in normal and reverse stationary phase
Author: Vieira, João Paulo Fernandes, 1982-
Advisor: Santana, Cesar Costapinto, 1948-
Abstract: Resumo: A enantiosseparação de alguns compostos é um brilhante e interessante tópico de muitas áreas da química analítica, principalmente na farmacêutica e biomédica. Sabe-se que apesar dos enantiômeros apresentarem fórmulas e massa molecular iguais, quando expostos em um ambiente biológico podem mostrar grandes diferenças nas suas atividades biológicas. O Fmoc-POAC (9-fluorenilmetiloxicarbonil -2,2,5,5-tetrametilpirrolidina-N-oxil-3-amino-4- ácido carboxílico) é um marcador paramagnético quiral com grande potencialidade de uso como derivado marcador de estruturas peptídicas com funções no organismo animal. De acordo com a literatura consultada, não há relatos de escalas semipreparativas na separação enantiomérica desse composto, extremamente necessária para testes de clínicos-analíticos. Este estudo teve como objetivo o desenvolvimento de métodos inovadores na separação enantiomérica do Fmoc-POAC e obtenção dos parâmetros necessários para um aumento de escala. O presente trabalho realizou uma avaliação experimental através de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) para enantiosseparação desse composto, com eluição isocrática e nas colunas quirais de fase estacionária normal e reversa: i) analítica da OD-RH Chiralcel® (150x4,6 mm); ii) Analítica Lux Cellulose-2 da Phenomenex® (250x4,6 mm); iii) Semipreparativa OD da Chiralcel® (150x10 mm); iv) Semipreparativa OD-RH da Chiralcel® (250x21 mm). A partir desses ensaios experimentais, foram estimados os parâmetros cromatográficos da enantiosseparação do marcador molecular Fmoc-POAC nas colunas estudadas, além de parâmetros de transferência de massa e termodinâmicos. Os resultados desse trabalho foram que todas as colunas estudadas apresentaram a possibilidade de separação enantiomérica do Fmoc-POAC através desses métodos relativamente simples comparados aos apresentados na literatura, com destaque para a coluna de fase estacionária normal Lux Cellulose-2 (250x4,6 mm), com resolução de até 18,4. De acordo com resultados obtidos, temos a possibilidade de realizar a separação e recuperação desse composto, lançando-se mão de técnicas cromatográficas de maior rendimento, como sistemas contínuos de separação cromatográfica

Abstract: The enantioseparation of some compounds has interesting application in several areas of analytical chemistry, especially in pharmaceutical and biomedical. It is well known that some compounds with same chemical formulas and molecular mass, when exposed to a biological environment, may show different biological activities. The 9- fluorenilmetiloxicarbonil-2,2,5,5-tetrametilpirrolidina-N-oxil-3-amino-4-carboxylic acid (Fmoc-POAC) is a chiral paramagnetic marker with great potential as a marker for peptide structures with functions in the animal organism. According to the literature, there are no reports of enantiomeric separation of this compound unless in laboratory scale and large scale would be necessary for clinical and analytical testing. This study aimed at the development of innovative methods for the enantiomeric separation of Fmoc-POAC as well as obtaining the necessary parameters for scale up of their purification. The present work carried out an experimental evaluation using High Performance Liquid Chromatography (HPLC) for this compound enantioseparation with isocratic elution and columns with normal and reverse chiral stationary phase: i) Analytical Chiralcel® OD-RH (150x4, 6 mm ), ii) Analytical Lux Cellulose-2 from Phenomenex® (250x4, 6 mm), iii) Semi-preparative Chiralcel OD® (150x10 mm), iv) Semi-preparative Chiralcel OD-RH® (250x21 mm). From these assays, chromatographic parameters were estimated for the enantioseparation of Fmoc-POAC molecular marker beside parameters related to the thermodynamics and mass transfer. The conclusions in this research were that all columns present the possibility of enantiomeric separation of Fmoc-POAC by methods relatively simple compared to those presented in the literature, specially the column with normal stationary phase Lux Cellulose-2 (250x4, 6 mm) with resolution of up to 18.4. The results indicate the possibility of enantioseparation and recovery of these compounds by high yield continuous chromatography techniques
Subject: Cromatografia líquida
Quiralidade
Language: Português
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2011
Appears in Collections:FEQ - Dissertação e Tese

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