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Type: TESE DIGITAL
Degree Level: Doutorado
Title: Sondas fluorescentes : síntese, caracterização e aplicações biológicas
Title Alternative: Fluorescent probes : synthesis, characterization and biological applications
Author: Lima, Maria Lair Sabóia de Oliveira, 1989-
Advisor: Marsaioli, Anita Jocelyne, 1946-
Abstract: Resumo: A síntese de novos compostos com propriedades fluorescentes é uma ferramenta importante para o estudo das atividades químio-enzimáticas nos mais variados modelos celulares. Estas aplicações variam desde a marcação de regiões celulares específicas (como organelas, membranas, e material nuclear) até o estudo do perfil enzimático, que pode ser investigado através de sondas fluorogênicas que revelam a presença de uma dada atividade enzimática relacionada a um determinado fenômeno. Neste contexto, esta tese apresenta-se dividida em 3 capítulos, que abordam desde a síntese e caracterização de novos compostos fluorescentes (Capítulo I), a aplicações biológicas direcionadas de sondas fluorogênicas que utilizam a umbeliferona (Capítulo II) e a resorufina (Capítulos II e III) como sensores na detecção de diferentes atividades enzimáticas. Assim, no Capítulo I são apresentadas diferentes etapas sintéticas para obtenção de derivados de imidazopiridinas e de imidazopirimidinas com interessantes propriedades fluorescentes. No total, 12 compostos foram sintetizados, com caracterizações fotofísicas inéditas na literatura. Já no Capítulo II, aplicações biológicas mais específicas passam a serem discutidas. Este capítulo foca, principalmente, na implementação de uma metodologia para detecção simultânea de hidrolases em micro-organismos, com sondas que apresentam diferentes fluoróforos (resorufina e umbeliferona) e grupos funcionais (epóxido e éster) que, após ação enzimática, culminam na mesma cascata química de liberação do fluoróforo. A esta metodologia, denominamos triagem multienzimática. Neste capítulo, prosseguimos com a aplicação de sondas fluorogênicas na investigação dos excessos enantioméricos (ee) e conversões das reações enzimáticas, utilizando sondas enantiomericamente enriquecidas derivadas da umbeliferona, com uma metodologia implementada por nosso grupo de pesquisas, a qual denominamos de Quick-ee. Ainda no contexto biológico, o Capítulo III apresenta a elucidação de uma cascata enzimática presente em células tumorais de mama e de próstata humana, envolvendo PSTP (proteínas serina/treonina fosfatases) e ADH (álcool desidrogenases), importantes enzimas associadas à atividade tumoral

Abstract: New fluorescent compounds are important chemo-enzymatic tools to reveal enzymatic activities in vitro and in vivo environments. These applications can reveal organelles, membranes, nucleus and enzymatic activities with fluorogenic probes, signaling the presence of specific enzymes. In this context, this thesis is presented in 3 chapters, which cover the synthesis and characterization of new fluorescent compounds (Chapter I), to direct biological applications of fluorogenic probes using umbelliferone (Chapter II) and resorufin (Chapters II and III) as sensors in the detection of different enzymatic activities. Thus, Chapter I shows different synthetic steps to obtain imidazopyridines and imidazopyrimidines derivatives with interesting fluorescent properties. In total, 12 compounds were synthesized, with novel photo physical characterizations in the literature. In Chapter II, more specific biological applications are discussed. This chapter focuses mainly on the implementation of a methodology for the simultaneous detection of hydrolases in microorganisms, with probes that present different fluorophores (resorufin and umbelliferone) and functional groups (epoxide and ester) that, after enzymatic action, culminate in the same chemical cascade of fluorophore release. This methodology is called multiplex screening. In this chapter, we proceed with the application of fluorogenic probes in the investigation of enantiomeric excesses (ee) and conversions of enzymatic reactions, using enantiomerically enriched umbelliferone derivatives probes with a methodology implemented by our research group, named Quick-ee. Also in the biological context, Chapter III presents the elucidation of an enzymatic cascade present in breast and prostate human tumor cells, involving PSTP (serine / threonine phosphatases) and ADH (alcohol dehydrogenases), important enzymes associated with tumor activity
Subject: Fluorescência
Sonda fluorogênica
Cascata químio-enzimática
Triagem de alto desempenho
Editor: [s.n.]
Citation: LIMA, Maria Lair Sabóia de Oliveira. Sondas fluorescentes: síntese, caracterização e aplicações biológicas. 2017. 1 recurso online ( 179 p.). Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química, Campinas, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/331622>. Acesso em: 1 set. 2018.
Date Issue: 2017
Appears in Collections:IQ - Tese e Dissertação

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