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Type: DISSERTAÇÃO
Degree Level: Mestrado
Title: Ação do perfluoroctano em cultura de celulas vero
Author: Estacia, Paulo
Advisor: Wada, Maria Lucia Furlan, 1953-
Abstract: Resumo: Cultura de células Vero foram usadas como modelo para avaliar a ação de um perfluorocarbono quido (PFCL) comumente usado em oftalmologia, nas clrurgIas vitreoretinianas. O Perfluoroctano (PFOC) é utilizado neste procedimento cirúrgico por ter, entre outras características, alto peso específico, facilitando portanto o reposicionamento da retina. Foi avaliado o comprometimento de tapetes de células Vero submetidos à ação do PFOC e o efeito ocasionado a outros tapetes da mesma cultura celular sob pressão exercida por lamínulas de vidro com um peso e área equivalentes ao peso do PFOC. As alterações celulares foram comparadas após 6, 12 e 24h de contato do PFOC e do peso das laminulas com os tapetes celulares. As células foram avaliadas quanto às alterações morfológicas, com coloração por Cresil Violeta (CV); cito quimicamente, através de coloração com o Azul de Toluidina (AT) pH 4,0 e imunocitoquímicamente, com o uso de anticorpos anti-actina e anti-vimentina. Os resultados mostraram comprometimento das células sob o efeito do peso, com retração citoplasmática e formação de prolongamentos celulares ligando as células entre si. Foi observada também uma diminuição do número de células presentes no tapete. Sob a ação do PFOC o comprometimento celular foi maior, tendo as células apresentado degeneração mais marcante e diminuição do número de células mais acentuado. Estes resultados eram mais evidentes à medida que aumentava o tempo de contato das células com o PFOC sendo que após 24h células integras eram observadas apenas na região periférica da gota. Nas áreas do tapete celular que não estavam sob o efeito do peso das lamínulas ou do PFOC não foi observada nenhuma modificação nas células. As alterações celulares decorrentes do efeito fisico ocasionado pela alta gravidade específica do PFOC eram esperadas e foram encontradas também nas células que estavam sob o efeito de um peso proporcional inerte. O comprometimento mais acentuado e o surgimento de alterações mais precoces nas células sob o efeito do PFOC faz acreditar que ele tenha uma ação tóxica sobre as células e que não atue única e exclusivamente pelo peso. Considerando o comprometimento celular que encontramos em células submetidas ao efeito fisico, não tóxico, do peso produzido por lamínulas, o uso de substâncias de alto peso específico para manter a retina posicionada leva a um dano celular, o que deve ser considerado quando utilizadas por longos penodos de tempo. Além disso, as alterações encontradas de comprometimento celular, que se acentuam com o tempo, não recomendam o uso do PFOC como substituto vítreo de longo prazo e mostram a importância da sua remoção após o ato cirúrgico

Abstract: Culture of Vero cells was used as a model to evaluate the action of one of the .liquid perfluorocarbons (PFCL) most commonly used in ophthalmology in vitreo retinal surgeries, The Perfluoroctane (PFOC) has among other characteristics a high specific weight, which consequently facilitates the replacement of the retina. Analyses were made of the damage incurred to monolayers of Vero cells that were submitted to the action of PFOC, or the effect on the same confluent cells weighted down by a corresponding layer of glass coverslips that were equivalent to the PFOC weight and area. The cellular alterations were compared after 6,12 and 24 hours of contact with the PFOC or with the coverslips' weight on the cellular monolayer The cells were evaluated with three methods: cresyl violet (CV) staining for morphological alterations; cytochemically, through staining with toluidine blue (TB) pH 4.0; and immunocytochemically, with the use of anti-actin and anti-vimentin antibodies. The results show damage to the cells, under the effect of weight, with cytoplamic retraction and formation of the cellular prolongations that bind the cells together. Also, a reduction in number of cells in the monolayer was observed but cells were found under the weight up to 24 hs of incubation. Cellular damage was greater in contact with PFOC, as the cells presented a more marked degeneration and the reduction of their number was more accentuated, with the alterations in alI cells in contact with PFOC after 24 hs. These results were more evident as the time of cell contact with PFOC or the coverslips' weight increased. In the areas of the cellular monolayer that were not submitted to these factors no modification was observed. _llular alterations resulting ITom the physical effect caused by the high specific gravity of the PFOC were expected and were also found in cells under the effect of a proportional inert weight. The greater damage and the precocious alterations in the cells under the effect of the PFOC suggest a toxic interaction with the cells and not a reaction exc1usively due to weight. Consjdrring the damage that we found in cells submitted to the physical non-toxic effect of he weight of coverslips' weight, the use of substances with a high specific weight to stabilize the retina over long periods of time seems to be limited. Moreover, the cellular damage verified in this study, which increased with time does not suggest the use of the PFOC as a vitreous substitute over long periods of time and shows the importance of its removal after the surgical procedure
Subject: Oftamologia
Language: Português
Editor: [s.n.]
Citation: ESTACIA, Paulo. Ação do perfluoroctano em cultura de celulas vero. 1999. 22f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, [SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/317786>. Acesso em: 24 jul. 2018.
Date Issue: 1999
Appears in Collections:IB - Tese e Dissertação

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